碧云天生产的Western萤光检测试剂BeyoECL Star是一种特超敏ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于BeyoECL Plus,可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
碧云天生产的Western萤光检测试剂目前共有三种,分别是P0018S/P0018M BeyoECL Plus、P0018AS/P0018AM BeyoECL Star和P0018FS/P0018FM BeyoECL Moon。常规的Western检测,优先推荐使用BeyoECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测,例如内参蛋白等的检测,推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测,不太推荐使用BeyoECL Moon,因为使用BeyoECL Moon时由于检测灵敏度特别高,容易产生过曝的现象。
BeyoECL Star灵敏度极高,比DAB显色的灵敏度至少高1000倍,比Amersham公司的ECL或碧云天以前生产的BeyoECL的灵敏度高100-500倍左右,比碧云天生产的BeyoECL Plus的灵敏度高约5-10倍(参考图1),比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上,实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级,500飞克辣根过氧化物酶用BeyoECL Star检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时,信噪比大于5。