1. 抗原样品制备

根据不同的样品选择合适的处理方法

2. 磁珠预处理

混悬 Anti-c-Myc 磁珠，取 20 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬，置于磁力架上磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 2 次。

3. 样品的结合

在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 细胞裂解液，充分混悬，置于翻转混合仪孵育，室温孵育 2 小时或者 4℃ 条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离，弃上清。

注： 结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。

4. 洗涤

在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬磁珠，磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 3 次，直到洗涤后的上清液中 OD₂₈₀ 小于0.05 为止。

注： 如上清液的 OD₂₈₀ 大于 0.05，适当增加洗涤次数即可。

5. 洗脱

在上述分离得到的磁珠中加入 50 μL 的 1× 蛋白上样缓冲液，95℃ 加热 5 分钟。冷却后，磁性分离，取上清进行 SDS-PAGE 检测。